JM-DGM淋巴细胞分离液

产品名称

通用名称:JM-DGM淋巴细胞分离液

商用名称:JM-DGM淋巴细胞分离液

英文名称: Lymphocyte Separation Medium

包装规格

200ml

预期用途

适用于从人抗凝血液中分离单个核细胞(主要为淋巴细胞),无菌条件下所分离的细胞可用于免疫学检测。

检验原理

外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞等细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同,红细胞和白细胞等细胞密度较大,为 1.090 g/ml 左右,而淋巴细胞和单核细胞密度为 1.075~1.090 g/ml,血小板为 1.030~1.035 g/ml。

为此,本公司将葡聚糖(右旋糖酐)和泛影酸葡甲胺按一定比例混合,调整比重、pH 值和渗透压,经过澄清及除菌过滤后制成一种密度在 1.077g/ml 并且近于等渗的溶液(分层液),经过密度梯度离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,从而将各种血细胞加以分离。

检验方法

取新鲜抗凝血 1ml,与注射用生理盐水1:1 混匀后,小心加于 2ml 的细胞分离液之液面上,以 400g 离心(半径 15cm 水平转子)20 分钟,此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。收集第二层细胞放入含注射用生理盐水 4-5毫升的试管中,充分混匀后, 400g,离心 20 分钟。沉淀经反复洗2 次即得所需细胞。(此方法效果较好,推荐使用)

主要组成成份

本品为带有乳光或微乳光的注射水溶液,主要组成成份是葡聚糖(右旋糖酐)与泛影酸钠。

储存条件及有效期

18-25℃避光保存,有效期 2 年。启封后置 4℃保存,有效期 1 周。本品为真空包装,未启封前置于 10℃ 以下易出现白色结晶,影响分离效果。

适用仪器

半径 15cm 水平转子离心机。

样本要求

本分离液要求血液为新鲜的抗凝血,血液收集时应无菌操作且在储存、处理和运输过程中避免冷冻和冷藏。

参考值(参考范围)

收集淋巴细胞的纯度大于 80%。

检验结果的解释

由于各品牌离心机的性能不同,国内南北地区温度环境和四季的差异,可能影响分离效果,用户可以调节离心转数和离心的时间,摸索最佳的分离条件(具体分离条件各实验室自定)。

检验方法的局限性

本试验要求,在正常大气压下,样本、分离液及分离环境温度为 20℃± 2℃。本分离液在低温时呈较高密度,在高温时呈较低密度。

产品性能指标

密度1.077 ± 0.002g/ml
pH7.0-8.0
渗透压280-305mOsmol/kg
内毒素 ≤0.5EU/ml
无菌直接接种培养 14 天后培养基澄清
澄明度及不溶性颗粒物每50ml溶液中含10μm以上的不溶性微粒20粒以下,含 25μm 以上的不溶性微粒 5 粒以下

注意事项

  • 1. 启封后应置4℃保存,避免微生物的污染。
  • 2. 细胞分离液从冰箱取出后,不可立即使用,需待溶液温度升至室温时,摇匀后使用。
  • 3. 整个分离过程中,温度应控制在 20℃± 2℃且在无菌环境下进行,避免微生物的污染,否则会影响分离质量。
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