NK细胞体外高效扩增试剂盒

---最简单最高效的NK细胞扩增方法!

用 途:用于从外周血或者机采血中的单个核细胞(MNC)在体

外高效扩增成自然杀伤(NK)细胞

优 势:

  • 1、扩增效率高,使用5x107起始单个核细胞(MNC)细胞,经过15天培养,总细胞数可以扩增约50倍左右,目的细胞(NK细胞)数可以扩增500倍以上。
  • 2、目的细胞百分比高,NK细胞纯度可以达到90%
  • 3、完全无血清培养
  • 4、低成本

成 份:包含细胞培养必须的试剂因子,无血清培养基及细胞培养袋等

各种动物外周血和脏器组织NK细胞分离试剂盒操作说明

1、试剂盒内容

试剂 全血及组织匀浆稀释液 100ml
试剂 细胞洗涤液 100ml
试剂B 100ml
试剂D 100ml
试剂E 100ml
说明书 1份

2、操作方法(操作全过程应在20-25度环境下进行)

1. 取 1ml肝素抗凝血与全血及组织匀浆稀释液(或胎牛血清或人血清悬起匀浆的细胞 1X107/ml)1:1混合后再按2:1的比例与E液混合,20℃-25℃静置3分钟,吸取上层浑浊液,弃去大部分红细胞。在10ml或15ml玻璃离心管中依次小心加入B、D两种液体各1ml,制成梯度界面(液面分层一定清晰)。将吸取的上层浑浊液叠加于D液之液面上,以400g(约1500转/分)离心15分钟(半径15cm水平转子),浑浊液与D液间的界面为NK细胞层.(提取率约为80%)。

2. 吸出NK细胞层以细胞洗涤液洗涤三次备用。细胞放入含细胞洗涤液(Cat#2010x1118)4-5毫升的试管中,充分混匀后,以500g(约1800转/分)离心20分钟。沉淀经反复洗2次即得所需细胞。

分离图例:

3、注意

TBD 实验室的细胞分离培养基是敏光型的。这种培养基在运输和贮藏过程中应避光保温。由于各品牌离心机的性能不同,国内南北地区温度环境和四季的差异,可能影响分离效果,用户可以调节离心转数,调节离心的时间,摸索最佳的分离条件(具体分离条件各实验室自定)。组织,血液,细胞要求新鲜,避免冷冻和冷藏。

4、贮藏

18-25℃避光保存。启封后置4℃保存。本品为真空包装,未启封前置于10℃以下易出现白色结晶,影响分离效果。

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